支原體分離用固體培養(yǎng)基用于確診泌尿生殖道支原體,能選擇性培養(yǎng)解脲支原體及人型支原體。經(jīng)典的液體培養(yǎng)基根據(jù)支原體分解底物使pH改變,從而使培養(yǎng)基的顏色改變中推斷支原體的存在于否。液體培養(yǎng)簡(jiǎn)便快速,但存在雜菌干擾而致的假陽(yáng)性、假陰性、方法不夠直接等缺點(diǎn)。固體培養(yǎng)則通過(guò)低倍鏡下觀察解脲支原體棕黑色海膽樣菌落和人型支原體油煎蛋樣菌落,而確證支原體的存在。同時(shí)通過(guò)直接菌落計(jì)數(shù)推斷出標(biāo)本中支原體的真實(shí)含量——cfu,顯示出比液體培養(yǎng)基更為準(zhǔn)確、定量的優(yōu)點(diǎn)。
【試劑盒組成】Φ70mm平皿10只,說(shuō)明書1份。
【用途】:
1、對(duì)解脲支原體(UU)和人型支原體(MH)進(jìn)行zui終確證(可見(jiàn)典型菌落);
2、對(duì)標(biāo)本直接進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)——CFU
【標(biāo)本采集】: 提示:①在未使用抗生素前采集標(biāo)本;②盡可能多地采集黏膜細(xì)胞。
宮頸標(biāo)本:擦去宮頸口多余的黏液,用拭子采集宮頸標(biāo)本(孕婦在宮頸口采集標(biāo)本)。
尿道標(biāo)本:清潔尿道口,并用拭子擦取尿道黏膜細(xì)胞;
尿液標(biāo)本:離心取尿沉渣,用無(wú)菌生理鹽水恢復(fù)至原體積后接種;
精液標(biāo)本:直接接種;
5、陽(yáng)性培養(yǎng)液:培養(yǎng)瓶微變紅色時(shí),可直接接種。
【操作步驟】:
標(biāo)本接種前將平板置于35~37℃孵箱15分鐘,使瓊脂表面干燥;
用本所提供的尿素—精氨酸培養(yǎng)基,洗脫標(biāo)本后,滴加3滴20ul標(biāo)本在瓊脂板面上(不要在瓊脂上劃線),3滴標(biāo)本必須分開;其它液體標(biāo)本直接滴加。
將平板放在室溫下5分鐘,使標(biāo)本滲干;
覆轉(zhuǎn)平板,置于35~37℃的微需氧環(huán)境中培養(yǎng)24~72小時(shí)。
【結(jié)果判斷】: 24~72小時(shí)后用低倍鏡(10×物鏡)觀察瓊脂表面,并進(jìn)行判斷:
解脲支原體——棕黑色海膽樣菌落(10~50um)
人型支原體——油煎蛋樣菌落(100~300um)