麻豆国产成人av高清在线-国产三级精品三级在线看-四虎国产永久免费精品视频-日韩卡一卡2卡3卡4卡

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 生物試劑揭示免疫組化中抗體選擇要求
生物試劑揭示免疫組化中抗體選擇要求
更新時間:2014-09-28   點(diǎn)擊次數(shù):592次

生物試劑揭示免疫組化中抗體選擇要求

1、一抗選擇要點(diǎn)

(1)選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一特異抗原決定簇結(jié)合,就象導(dǎo)*地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中,一般單克隆抗體特異性強(qiáng),但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對較低;而多克隆抗體特異性稍弱,抗體的親和力強(qiáng),靈敏度高,但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過封閉等有所避免)。

(2)種屬來源。一般家兔來源的抗體多是多克?。欢∈髞碓吹目贵w多是單克隆,但也有另外。這條主要要與后面的二抗來源相匹配。

(3)實驗?zāi)康?/strong>是檢測什么種屬的抗原,即species reactivity。這一點(diǎn)很重要,一般說明書上都有注明,如小鼠Ms、大鼠Rat、人Hum等等。

(4)能否做免疫組化。一般一抗說明書都會注明做WB、IHC、ICC、IF等,建議選擇注明的抗體,因為一般都是經(jīng)過文章證明。

(5)檢測標(biāo)本類型。用于檢測石蠟切片還是冰凍切片,一般能做石蠟切片的抗體,可能都可以用來檢測冰凍切片,但能做冰凍切片的抗體,不一定能檢測石蠟切片中的抗原。

(6)。國外抗體商原裝抗體質(zhì)量一般沒問題,但有點(diǎn)貴;而國內(nèi)分裝用的一抗工作液,價格便宜,但有時結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性稍差,尤其不同批次重復(fù)性較差。

(7)價格與質(zhì)量的矛盾。一抗原裝質(zhì)量可能會好點(diǎn),因為許多一抗避免反復(fù)凍融,且在稀釋液中穩(wěn)定性較差(若時間長),但價格較貴。

2、二抗選擇要點(diǎn)

(1)種屬來源。主要根據(jù)一抗種屬來源來決定購買二抗來源,如一抗是小鼠來源,那二抗就買抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。

(2)標(biāo)記物的選擇。有HRP、Biotin、熒光素等標(biāo)記物。一般SP三步法二抗選擇Biotin標(biāo)記的二抗,以與后面的SP結(jié)合反應(yīng);而免疫熒光染色就需要購買不同熒光素標(biāo)記的二抗,如羅丹明、FITC、Cy3等常用熒光素。這主要與后面有無三抗和三抗種類有關(guān)。

(3)選擇IgM還是IgG。一般一抗是IgM,那么二抗就選擇IgM;反之,一抗是IgG,則二抗選擇IgG。

 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
武乡县| 蚌埠市| 日喀则市| 广东省| 小金县| 潮州市| 河东区| 尼勒克县| 会理县| 青神县| 六枝特区| 万荣县| 沙湾县| 绵竹市| 卢龙县| 耿马| 吉林省| 无极县| 巴彦县| 静乐县| 额敏县| 容城县| 岑巩县| 虞城县| 庄河市| 沧州市| 东乡县| 江川县| 体育| 伊川县| 万源市| 高雄市| 乌拉特中旗| 金湖县| 长沙县| 金平| 西乌珠穆沁旗| 大田县| 虹口区| 鹤壁市| 望江县|