簡(jiǎn)要描述:
Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無(wú)機(jī)磷。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1250
商品詳情:
Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒測(cè)定意義:Ca++ Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無(wú)機(jī)磷。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3221 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3221-1 | 50管/24樣 | 可見(jiàn)分光光度法 |
測(cè)定原理:根據(jù)Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無(wú)機(jī)磷,通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)確定ATP酶活性高低。需自備的儀器和用品:可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
類固醇硫酯酶同工酶SELISA試劑盒 STS免費(fèi)代測(cè)試劑
類固醇合成急性調(diào)節(jié)蛋白ELISA試劑盒 STAR免費(fèi)代測(cè)試劑
酪蛋白激酶1δELISA試劑盒 CSNK1δ免費(fèi)代測(cè)試劑
轉(zhuǎn)氨酶ELISA試劑盒 TAT免費(fèi)代測(cè)試劑
激酶2ELISA試劑盒 Tyk2免費(fèi)代測(cè)試劑
磺基轉(zhuǎn)移酶2ELISA試劑盒 TPST2免費(fèi)代測(cè)試劑
磺基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒 TPST1免費(fèi)代測(cè)試劑
狼瘡腦抗原ELISA試劑盒 LBA1免費(fèi)代測(cè)試劑
蘭尼定受體3ELISA試劑盒 RYR3免費(fèi)代測(cè)試劑
賴氨酰氧化酶樣蛋白4ELISA試劑盒 LOXL4免費(fèi)代測(cè)試劑
賴氨特異性去甲基化酶4AELISA試劑盒 KDM4A免費(fèi)代測(cè)試劑
醌型二氫蝶啶還原酶ELISA試劑盒 QDPR免費(fèi)代測(cè)試劑
蝰蛇毒素ELISA試劑盒 Viperin免費(fèi)代測(cè)試劑
喹啉磷核糖基轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒 QPRT免費(fèi)代測(cè)試劑
快肌肌鈣蛋白CELISA試劑盒 TNNC2免費(fèi)代測(cè)試劑
Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒脫氫酶(GDH)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣
脫氫酶(GDH)測(cè)試盒/微量法100管/96樣
脫氫酶(GLDH/GDH)測(cè)試盒/比色法50T/48樣
脫羧酶(GAD)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣
脫羧酶(GAD)測(cè)試盒/微量法100管/48樣
(GLN)測(cè)試盒/比色法100管/48樣
合成酶(GS)測(cè)試盒/比色法50管/24樣
合成酶(GS)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣
合成酶(GS)測(cè)試盒/微量法100管/48樣