土壤熒光素二乙酸酯(FDA)水解酶測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義

FDA水解反應(yīng)能很好的反應(yīng)土壤中微生物活性和土壤質(zhì)量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化，是土壤質(zhì)量研究中的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。

測(cè)定原理

FDA是一種無(wú)色化合物，在介質(zhì)中能被許多土壤酶所催化水解，并經(jīng)脫水反應(yīng)，產(chǎn)生酶解終產(chǎn)物熒光素，穩(wěn)定不易被分解，并在490nm處有強(qiáng)吸收峰，通過(guò)檢測(cè)490nm處的吸光值變化可計(jì)算得FDA水解酶活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

類(lèi)白細(xì)胞抗原B27ELISA試劑盒 HLA-B27免費(fèi)代測(cè)試劑

類(lèi)白細(xì)胞抗原AELISA試劑盒 HLA-A免費(fèi)代測(cè)試劑

雷帕霉素靶蛋白ELISA試劑盒 mTOR免費(fèi)代測(cè)試劑

酪氨酰tRNA合成酶ELISA試劑盒 YARS免費(fèi)代測(cè)試劑

酪氨酰DNA磷二酯酶1ELISA試劑盒 TDP1免費(fèi)代測(cè)試劑

蛋白激酶受體TYRO3ELISA試劑盒 TYRO3免費(fèi)代測(cè)試劑

狼瘡抗凝抗體ELISA試劑盒 LAC/LA免費(fèi)代測(cè)試劑

蘭尼堿受體2ELISA試劑盒 RYR2免費(fèi)代測(cè)試劑

賴氨特異性脫甲基酶5AELISA試劑盒 JARID1A免費(fèi)代測(cè)試劑

萊姆IgGELISA試劑盒 Lyme-IgG免費(fèi)代測(cè)試劑

跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11ELISA試劑盒 MS4A11免費(fèi)代測(cè)試劑

空泡毒素相關(guān)蛋白AELISA試劑盒 VacA免費(fèi)代測(cè)試劑

空腸彎曲菌黏附蛋白ELISA試劑盒 PEB1免費(fèi)代測(cè)試劑

空腸彎曲菌ELISA試劑盒 IgG免費(fèi)代測(cè)試劑

克雷白氏桿菌ELISA試劑盒 klebsiella免費(fèi)代測(cè)試劑
土壤熒光素二乙酸酯(FDA)水解酶測(cè)試盒淀粉含量測(cè)試盒100管/96樣 微量法

淀粉含量測(cè)試盒50管/48樣 可見(jiàn)分光光度法

直鏈淀粉含量測(cè)試盒100管/96樣 微量法

直鏈淀粉含量測(cè)試盒50管/48樣 可見(jiàn)分光光度法

支鏈淀粉含量測(cè)試盒100管/96樣 微量法

支鏈淀粉含量測(cè)試盒50管/48樣 可見(jiàn)分光光度法

α測(cè)試盒100管/48樣 微量法

α測(cè)試盒50管/24樣 可見(jiàn)分光光度法

β測(cè)試盒100管/48樣 微量法
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。